A、在间期DNA复制之前，一条染色体上只有一个DNA分子，因此此段时间DNA含量和染色体数目相同，A错误；
B、有丝分裂前期和中期时，一条染色体上含有两个DNA分子，因此DNA含量和染色体数目肯定不同，B正确；
C、有丝分裂后期时着丝点分裂，分裂后一条染色体上只有一个DNA分子，因此后期时DNA含量和染色体数目相同，C错误；
D、有丝分裂后期着丝点分裂后，一条染色体上只有一个DNA分子，因此后期和末期时DNA含量和染色体数目相同，D错误．
故选：B．
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